Chào mừng các bạn đến với Fecomic! Hôm nay chúng ta sẽ cùng tìm hiểu về hiện tượng bleed-through trong công nghệ hiển thị màu sắc của manga và anime, cụ thể là Bleach 647. Bleed-through là hiện tượng gì? Làm thế nào để giảm bleed-through? Cùng khám phá nhé!

Hiện tượng bleed-through trong công nghệ hiển thị màu sắc

Bleed-through, còn được gọi là crossover hoặc crosstalk, là hiện tượng xảy ra khi ánh sáng phát ra từ một chất fluorophore được phát hiện trong kênh quang điện hoặc thông qua bộ lọc dành riêng cho chất fluorophore khác. Hiện tượng này thường gây khó khăn trong việc giải thích kết quả thực nghiệm, đặc biệt là khi nghiên cứu sự tương tác giữa các fluorophore hoặc đo lường định lượng, như trong các nghiên cứu về chuyển năng lượng giao hòa (FRET) và photopheo (FRAP).

Hiện tượng bleed-through thường phức tạp việc hiển thị mẫu có hai hoặc nhiều nhãn fluorescent (hoặc các mẫu mô thực vật có sự tự phát quang tự động cao), trừ khi các phổ quang hợp chất fluorophore rất khác nhau. Đối với trường hợp đánh dấu kép với nhãn xanh và đỏ truyền thống, fluorescein và rhodamine, bleed-through chỉ có thể được giảm bằng cách sử dụng bộ lọc fluorescence được tối ưu hóa, nhưng không bao giờ được loại bỏ hoàn toàn. Hiệu ứng này xảy ra do việc chất fluorophore này có phổ hấp thụ và phát quang rất rộng mà có một mức độ trùng lắp đáng kể. Do đó, việc kích hoạt fluorescein bằng laser 488 nm cũng sẽ tạo ra kích hoạt rhodamine, mặc dù mức độ ít hơn. Ngoài ra, sự phát quang của fluorescein sẽ được phát hiện trong kênh quang điện hoặc bộ lọc widefield dành riêng cho rhodamine.

Giảm bleed-through bằng điều chỉnh bộ lọc và fluorophore

Để giảm bleed-through, có thể điều chỉnh bộ lọc quang hoặc chọn chất fluorophore có phổ hấp thụ và phát quang được phân tách tốt. Thay thế Alexa Fluor 568 cho Cy3, chẳng hạn (sự khác biệt về bước sóng phát quang chỉ là 35 nanometer) sẽ giúp giảm bleed-through đáng kể.

Lựa chọn fluorophore phù hợp

Hiệu quả của việc giảm bleed-through phụ thuộc vào lựa chọn fluorophore có phổ hấp thụ và phát quang được tách biệt tốt như thế nào. Lựa chọn fluorophore có phổ hấp thụ và phát quang gần nhau sẽ dẫn đến bleed-through cao hơn và ngược lại. Ví dụ, fluorophore xanh và vàng cam fluorescein và Alexa Fluor 555 có mức độ trùng lắp phổ trung bình. Trong khi đó, fluorophore xanh fluorescein và fluorophore cam da cam Alexa Fluor 594 có mức độ trùng lắp thấp hơn. Sự tách biệt phổ tốt nhất trong các fluorophore phát quang ánh sáng có thể nhìn thấy là so sánh giữa Alexa Fluor 488 và Alexa Fluor 633.

Ánh sáng quantum

Quantum dots là những hạt nhỏ bao gồm bột nhiệt đới được phủ một lớp polymer hydrophilic và kết dính với các khái niệm sinh học khác. Quantum dots có nhiều ưu điểm so với các fluorophore truyền thống. Điểm hấp thụ và phát quang của quantum dots không phụ thuộc vào bước sóng kích thích màu sắc, điều này giúp giảm bleed-through và tăng độ sáng. Quantum dots có thể được kích thích bằng nhiều bước sóng laser, nhưng đạt hiệu quả cao nhất với laser màu xanh 405 nanometer.

Cách khắc phục bleed-through

Để khắc phục bleed-through, có thể sử dụng phương pháp xử lý ảnh sau khi thu thập hình ảnh. Cần chuẩn bị một loạt các mẫu để kiểm tra các hiện tượng bleed-through và xử lý dữ liệu một cách chính xác. Sử dụng các phần mềm chuẩn để xử lý dữ liệu bleed-through và kiểm tra tính chính xác của kết quả thu được.

Kết luận

Bleed-through là một hiện tượng phức tạp trong công nghệ hiển thị màu sắc của anime và manga. Tuy nhiên, thông qua việc lựa chọn fluorophore phù hợp, điều chỉnh bộ lọc quang và sử dụng các phương pháp xử lý ảnh sau khi thu thập dữ liệu, bleed-through có thể được giảm thiểu và cải thiện chất lượng hình ảnh.